nanohelix 一步法 RT-PCR 試劑盒說明書

一步法 RT-PCR 試劑盒 [ Speed-Pfu ]

HelixCript™ One-Step RT-PCR [ Speed-Pfu ] 設(shè)計用于在單管反應中從總轉(zhuǎn)錄本中靈敏擴增靶基因。HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase、Helixzyme™ RNase Inhibitor 和 HelixAmp™ Speed-Pfu聚合酶（高保真快速 PCR 酶）作為酶混合物提供。2x Reaction Mix 包含*的緩沖液、MgCl ₂和 dNTP。

圖 1. 使用 HelixCript™ 一步法 RT-PCR 試劑盒 [ Speed-Pfu ] 的快速 RT-PCR。一步 RT-PCR 反應在修改后的方案下進行如下：一步 RT-PCR 反應所需的總時間為 1 小時。使用 HelixCript™ One-Step RT-PCR Kit [ Speed-Pfu ] 和用于人 β-珠蛋白的引物組，對1 至 100 ng 人血液總 RNA 進行一步 RT-PCR。PCR反應在95 ℃（10秒）、55 ℃（10秒）和72 ℃（20秒）進行35個循環(huán)。

應用

• 從 RNA 中檢測靶基因轉(zhuǎn)錄物

• 目標 cDNA 產(chǎn)物的克隆

• RNA轉(zhuǎn)錄水平的半定量、定量分析

內(nèi)容

• 酶混合物 [ Speed-Pfu ]，2x 反應混合物 [ Speed-Pfu ]

質(zhì)量控制

使用 HelixCript™ 一步法 RT-PCR 試劑盒 [ Speed-Pfu ] 對 cDNA 合成和靶基因轉(zhuǎn)錄物 PCR 擴增的活性通過 10 倍連續(xù)稀釋的人總 RNA 的檢測限 (LOD) 測定進行評估。